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讨论山银花和黄芩提取物的应用
发布时间:2018-03-21


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  【题目】山银花黄芩提取物对肉鸡生长的影响
  【第一章】山银花黄芩的化学成分和药理作用研究前言
  【第二章】对研究山银花黄芩材料与方法
  【第三章】提取物对肉鸡成长影响的结果
  【第四章】讨论山银花和黄芩提取物的应用
  【第五章-参考文献】植物提取物的作用研究结果

4讨论
  
  4.1山银花黄芩提取物的联合应用
  
  中药是中医临床用药的主要形式,是中医辨证论治理论精髓的具体体现。以中医理论指导及辩证论治为前提,通过合理有效的中药配伍,组成方剂应用于临床,是自古以来中医治病的一大特色。长期以来历代医家经过临床应用及验证,将配伍后疗效更优的药物固定下来而形成组合。配伍使用过程中要依据药物药理作用相互搭配,使药效发挥到最佳,同时对疾病治疗要有专一性,灵活性和适应性[51-55].山银花和黄芩均是中兽医常用的清热类药物。山银花具多种药理作用,主要有抑菌、杀菌作用、抗病毒作用、抗炎作用、抗过敏作用、解热作用和肝脏?;ぷ饔??;栖司弑敢志寡?、降血糖、抗肿瘤、增强机体免疫等生理功能,黄芩含有多种化学成分,药物价值高,如黄酮、有机酸、萜类、皂苷、微量元素等物质,近年来展现出极大的应用前景。中医上常使二者联合使用以产生更好的协同抗菌作用,如银黄颗粒、银黄冲剂、双黄连口服液等。本研究将山银花和黄芩制成山银花黄芩提取物,使其具备良好的、安全、无毒副作用的效果,并将其应用于畜禽养殖业,有望代替抗生素,减少抗生素残留造成的危害,保证畜禽食品的安全。
  
  4.2山银花黄芩提取物靶动物安全性分析
  
  山银花和黄芩均为中兽医常用的清热类药物,是我国传统的药材之一。在国内外的研究和应用中,证实了它多方面的药理作用和临床功能,兽医多用于畜禽细菌和病毒引起的混合感染。现代药理学研究也证实,银黄联合制剂应用较之单味药物使用,产生较好的协同作用,具有更好的清热解毒、抗菌消炎、提高动物机体免疫力的功效。本实验通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀试验、体外抑菌试验、体内抗感染试验、急性毒性试验对山银花黄芩提取物进行药理和毒理基础研究。在山银花黄芩提取物对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌体内抗感染效果研究中,山银花黄芩提取物能提高金黄色葡萄球菌和大肠杆菌最小致死量致病小鼠模型的存活率,并能极显着延长其存活时间,对感染金黄色葡萄球菌和大肠杆菌模型小鼠具有较好的?;ぷ饔?。
  
  得出0.5g/kg的临床推荐剂量,连用42天,成本分析预计0.04元/kg.同时以5倍、3倍和1倍临床推荐剂量对AA+肉鸡混饲,并对靶动物的精神状态、采食饮水、行为活动和粪便情况以及一般体征、生长性能及主要脏器等指数进行安全比对,综合评价该药物的药效及药物安全性,以探究其应用到畜禽养殖业的安全有效剂量,为投入临床使用做好准备。由结果可知,以5倍、3倍和1倍临床推荐剂量对AA+肉鸡混饲,并没有引起肉鸡的发病及死亡,且对肉鸡的一般体征、生长性能及主要脏器无不良影响,可见,以5倍临床推荐剂量对靶动物肉鸡混饲,连续给药50天是安全的。
肉鸡
  
  4.3山银花黄芩提取物对肉鸡生长影响的分析
  

  4.3.1各组肉鸡生长性能及血液理化指标差异性比较
  
  在山银花黄芩提取物对肉鸡生长性能影响的试验中,平均日增重及料重比方面,山银花黄芩提取物组最佳,其次为阳性对照组;平均日采食量方面,各组比较接近;死淘率方面,山银花黄芩提取物组显着低于阳性对照组和空白对照组。综合考虑,山银花黄芩提取物对肉鸡生长具有一定促进作用,全期可达到与阳性对照组相当的生长性能,并且在同等条件下,能够降低肉鸡死淘率。
  
  有研究表明,血浆中的甘油三酯水平可控制体内脂肪组织发育和脂肪沉积[56],体内胆固醇合成可由血清甘油三酯水平反映[57].总胆固醇的存在形式主要为酯型,通过生物转变来体现生理功能,其大部分由肝脏合成,仅小部分来源于饲料。甘油三酯主要由肝脏合成,甘油三酯与蛋白质结合可形成脂蛋白,动物生长发育及免疫系统与甘油三酯有关,其含量的变化可以反映动物体内膜类代谢情况。总胆固醇、甘油三酯是血脂代谢指标,临床上高血脂症可以通过检测甘油三酯和总胆固醇的水平来确定。高、低密度脂蛋白是体内运输胆固醇的两种脂蛋白,但是运输方向相反。低密度脂蛋白将内源性胆固醇从肝脏转运至各个组织,是组织转运肝脏合成内源胆固醇的主要形式。而高密度脂蛋白将脂蛋白和胆固醇转运至肝脏水解清除,因此,血清高密度脂蛋白水平维持在适当浓度,有助于体内血脂的代谢与转运,可使机体摄取所需的营养,又不会过度沉积脂类。在研究21日龄肉仔鸡血清甘油三酯含量、血清总胆固醇含量时,山银花黄芩提取物组低于空白对照组和阳性对照组;42日龄时,总胆固醇含量,山银花黄芩提取物组低于空白对照组,但差异性不显着;高密度脂蛋白方面,各组之间差异性不显着,但山银花黄芩提取物组高于空白对照组;低密度脂蛋白胆固醇,山银花黄芩提取物组显着低于阳性对照组和空白组。由此可见,山银花黄芩提取物在生长后期可提高肉鸡血清高密度脂蛋白含量,降低肉鸡血清总胆固醇含量,调节体内脂肪代谢。
  
  机体在正常代谢过程中能够持续产生自由基以及多种内源性抗自由基的活性物质,自由基才能保持动态平衡,从而维持机体氧化/抗氧化系统的平衡。随着现代肉鸡高密度饲养方式的普及,各种应激反应成为饲养过程中影响肉鸡生长性能、免疫功能和肉品质量的一个限制因素。当外界刺激机体引发应激时,机体会产生大量的自由基,如机体不能及时清除过多的自由基,则易引起机体产生氧化应激反应,造成氧化损伤。肉鸡较易发生脂质过氧化反应,因其体内脂质含量相对较高,形成的脂质过氧化物会对机体造成损伤??寡趸芰Τ潭鹊母叩陀牖宓慕】党潭扔凶殴叵得芮??;逯蠱DA、T-AOC、SOD、GSH-Px的活性能反映机体抗氧化能力及健康程度[58].生物体内脂质过氧化反应最终产生MDA,组织细胞的脂质过氧化程度和体内自由基产生的情况由MDA含量间接反映,机体内脂质过氧化的程度也可由MDA含量多少显示,并可间接反映细胞氧化损伤的严重性[59.60].而T-AOC和SOD活性是反映机体抗氧化能力的重要指标。
  
  T-AOC代表体内酶性和非酶性抗氧化物的总体水平,SOD是生物体内重要的抗氧化物酶,可以清除体内的自由基,抗衰老、抗炎症以及提高机体自身免疫功能[61],SOD的活性变化在一定程度上可反映出机体在胁迫逆境下的免疫力[62].
  
  GSH-Px和T-SOD是生物体主要的酶类抗氧化剂,通常情况下,动物体内的自由基形成及利用处于动态平衡状态,过多的自由基未能被机体及时的清除时,会攻击生物大分子,引起机体产生氧化损伤,其活性与机体清除自由基的能力成正比[63].山银花属忍冬科植物,具有清热解毒、凉散风热的功效,其主要的生物活性成分是黄酮类化合物。目前,山银花黄酮类化合物的药理活性报道文献较为少见。主要报道的是灰毡毛忍冬提取纯化物能抑制活性氧(ROS)的产生,减少机体的氧化应激[64].谢学明等[65]的研究证实华南忍冬的乙醇提取物对DPPH自由基有很强的清除活性。王柳萍等[66]认为山东忍冬和广西红腺忍冬均有明显的抗氧化活性。这些研究表明忍冬植物的黄酮类提取物具有抗氧化作用[67-69],本研究中,日粮中添加山银花黄芩提取物能提高GSH-Px和SOD含量,提高T-AOC含量,降低MDA含量,表明机体减少了氧自由基和脂质过氧化物的生成,总抗氧化能力增强,由此可见,山银花黄芩提取物有助于提高机体的抗氧化性。
  
  4.3.2各组肉鸡免疫指标及肠道形态差异性比较
  
  免疫器官是免疫细胞发育、增殖和分化的场所,在生长过程中免疫器官的发育程度以及功能强弱对禽类的免疫水平较为重要,因此运用免疫器官指数来反映禽类机体免疫水平[70].禽类的免疫器官主要有脾脏、胸腺和法氏囊[71].本试验中各组间免疫器官指数都未达到统计学显着水平。但可以看出,山银花黄芩提取物组的免疫器官指数普遍高于空白对照组,因此,山银花黄芩提取物有一定的提高免疫水平作用。
  
  血清免疫球蛋白含量是反映动物免疫功能变化的重要标志[72].禽类血清中免疫球蛋白Ig G较重要,其具备多种活性功能,如抗细菌、病毒、外毒素等,尤其在体液免疫中最为重要[73].
  
  Ig A大部分由淋巴组织和脾脏中的浆细胞生成,分为血清型与分泌型,Ig A主要参与黏膜局部免疫,通过结合相应病原微生物,阻止病原体粘附到细胞表面,在局部抗感染中发挥作用[74].
  
  Ig M是B细胞表面表达最早的抗体,主要淋巴组织和脾脏中的B细胞产生,在机体感染的早期起主导作用。溶菌酶是由单核细胞、巨噬细胞、中性粒细胞分泌的具有溶解细菌细胞壁的碱性蛋白酶[75],是吞噬细胞的物质基础,通过水解革兰氏阳性细胞壁的乙酰氨基多糖,破坏和消除侵入机体的细菌等,使细胞壁不溶性黏多糖分解为可溶性糖肽,导致细胞壁破裂内容物逸出进而细菌溶解。具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。溶菌酶与免疫球蛋白的功能紧密联系,可进入机体补体系统并增强抗体活性,从而杀灭有害微生物[76].本试验21日龄时,山银花黄芩提取物组Ig G、Ig M含量显着高于阳性对照组和空白对照组;山银花黄芩提取物组Ig A也高于阳性对照组和空白对照组,但差异性不显着;各组间的血液溶菌酶含量无显着差异。
  
  42日龄时,山银花黄芩提取物组Ig G含量显着高于阳性对照组和空白对照组;溶菌酶含量方面,山银花黄芩提取物组高于空白对照组,并显着高于阳性对照组。研究表明,日粮中添加山银花黄芩提取物在肉鸡生长前期可以提高肉鸡体内免疫球蛋白Ig G、Ig M含量,一定程度上能够增强机体免疫力。
  
  肠道是肉鸡对营养物质的消化、吸收的重要器官,消化道对营养物质消化和吸收能力通常通过小肠绒毛的高度、隐窝深度和V/C值的变化反映,所以小肠黏膜形态可影响对养分表观的利用率。绒毛高度如越高,则越利于小肠吸收营养物质;隐窝即肠腺,其深度可反映细胞的生成率,隐窝越浅,细胞发育越成熟[77];V/C值则综合反映小肠的功能状况,比值上升,证明黏膜结构改善,对营养物质的消化吸收能力增强,比值下降,肠道的吸收能力减弱[78].
  
  本研究结果表明,42日龄时,山银花黄芩提取物组和阳性对照组的十二指肠和空肠绒毛高度以及绒毛/隐窝比值均显着高于空白对照组,这可以说明山银花黄芩提取物可以促进绒毛生长,改善肉鸡肠道黏膜结构。
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